Método de identificación de cápsulas de gelatina bovina y porcina

El uso de cápsulas de gelatina en las industrias farmacéutica y nutracéutica está muy extendido debido a su capacidad para encapsular una variedad de compuestos. Sin embargo, la fuente de gelatina utilizada en estas cápsulas puede variar, siendo la bovina y la porcina las dos fuentes más comunes. En esta publicación del blog, como fabricante personalizado de cápsulas de gelatina bovina de alta calidad, Wecaps compartirá con usted el método de identificación de las cápsulas de gelatina bovina y porcina.

Entendiendo la composición de la gelatina

La gelatina es una proteína derivada del colágeno, que se extrae de los huesos, la piel y los tejidos conectivos de los animales. La principal diferencia entre la gelatina bovina y la porcina radica en los animales de origen y los tipos específicos de colágeno que contienen. La gelatina bovina se deriva principalmente del colágeno tipo I que se encuentra en las vacas, mientras que la gelatina porcina se deriva del colágeno tipo I que se encuentra en los cerdos.

Métodos de identificación

Técnicas moleculares

a. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR es una potente técnica de biología molecular que permite amplificar secuencias específicas de ADN, lo que permite identificar el material genético de la gelatina de origen. El método implica:

1. Preparación de la muestra: extraiga el ADN de las cápsulas de gelatina utilizando un kit de extracción de ADN. Esto implica disolver la gelatina en una solución tampón y tratarla con enzimas para liberar el ADN.

2. Amplificación por PCR: utilice iniciadores específicos para ADN bovino o porcino. Por ejemplo, se pueden utilizar iniciadores dirigidos a secuencias de ADN mitocondrial (ADNmt) específicas de bovino o genes mitocondriales específicos de porcino, como el citocromo b. El proceso de PCR amplifica estas secuencias específicas si están presentes.

3. Electroforesis en gel: Pasar los productos de PCR por un gel de agarosa para separarlos según su tamaño. La presencia de bandas específicas correspondientes al ADN bovino o porcino confirmará la procedencia de la gelatina.

b. PCR en tiempo real (qPCR)

La PCR en tiempo real, o PCR cuantitativa, es una técnica avanzada que permite cuantificar el ADN y proporciona más sensibilidad que la PCR tradicional. Implica:

1. Preparación de la muestra: similar a la PCR, extraiga el ADN de las cápsulas de gelatina.

2. PCR en tiempo real: utiliza sondas o colorantes fluorescentes que se unen a secuencias de ADN específicas. La intensidad de la fluorescencia se correlaciona con la cantidad de ADN objetivo, lo que permite la cuantificación de ADN bovino o porcino.

3. Análisis de datos: Analizar los datos de fluorescencia para determinar la presencia y cantidad de ADN bovino o porcino, identificando así la fuente de gelatina.

Técnicas basadas en proteínas

a. Espectrometría de masas (MS)

La espectrometría de masas se puede utilizar para analizar la composición proteica de la gelatina. El proceso incluye:

1. Preparación de la muestra: disuelva la gelatina en un disolvente apropiado y digiérala con enzimas proteolíticas para descomponerla en péptidos.

2. Análisis de péptidos: utilice la espectrometría de masas para analizar los fragmentos de péptidos. Compare los perfiles de péptidos con los perfiles de gelatina bovina y porcina conocidos para identificar la fuente.

b. Desorción/ionización láser asistida por matriz (MALDI) MS

La espectrometría de masas MALDI es un tipo específico de espectrometría de masas útil para identificar proteínas y péptidos. El proceso implica:

1. Preparación de la muestra: Prepare una matriz con la muestra de gelatina y aplíquela a la placa objetivo MALDI.

2. Espectrometría de masas: Analizar la muestra para obtener un espectro de masas. Los picos del espectro corresponden a las masas de los fragmentos de péptidos y pueden compararse con los espectros conocidos de la gelatina bovina y porcina.

c. Electroforesis

La electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) es una técnica utilizada para separar proteínas en función de su tamaño:

1. Preparación de la muestra: disuelva las cápsulas de gelatina en un tampón de muestra y aplíquelas a un gel SDS-PAGE.

2. Electroforesis: Separar las proteínas por tamaño y comparar el patrón de bandas del gel con patrones de referencia para gelatina bovina y porcina.

3. Identificación de proteínas: utilice técnicas de tinción o transferencia Western para identificar proteínas específicas que son características de la gelatina bovina o porcina.

Técnicas espectroscópicas

a. Espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier (FTIR)

La espectroscopia FTIR identifica composiciones moleculares basadas en la absorción infrarroja:

1. Preparación de la muestra: Prepare la muestra de gelatina como una película fina o utilizando una pastilla de KBr.

2. Espectroscopia: Analice la muestra mediante FTIR. Las distintas fuentes de gelatina tienen patrones de absorción de infrarrojos distintos que corresponden a sus vibraciones moleculares.

3. Interpretación de datos: Compare los espectros FTIR con los espectros de referencia para la gelatina bovina y porcina.

b. Espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN)

La espectroscopia de RMN proporciona información detallada sobre la estructura molecular de la gelatina:

1. Preparación de la muestra: disuelva la gelatina en un disolvente adecuado para el análisis de RMN.

2. Espectroscopia: Realice una espectroscopia de RMN para obtener datos de desplazamiento químico. Analice los espectros para identificar características moleculares específicas de la gelatina bovina o porcina.

3. Comparación: Compare los datos de RMN con los espectros de referencia de gelatina bovina y porcina conocida.

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